단백질 관련한 실험을 진행하려고 단백질을 샀는데 powder로 왔습니다.
저에겐 생소한 4mM HCl로 녹여서 사용하라는 guide를 받았는데
제 단백질이 산성의 조건에서 안정한 단백질이라 4mM HCl로 녹이라는건가요? 아니면 특별한 이유가 있나요??
- 어떤 단백질을 어떤 실험에 사용할 예정인가요?
Nucleolin 단백질을 이용할 예정이고, Nucleolin과 잘 붙는 것으로 알려진 AS1411이라는 aptamer(항체와 같은 기능을 하는 핵산 물질)를 이용해서 Nucleolin과 실제로 잘 붙는지 사전 실험을 해보려고 합니다.
- 해당 단백질은 중성 buffer에 잘 녹고 blocking assay용 이라면 산성에 녹일
필요는 없을 것 같습니다.
아 그렇군요..
좀 찾아보니까 TGF-beta1?이라는 단백질도 그렇게 녹이던데...
그럼 보통 어떤 실험을 하길래, 4mM HCl에 단백질을 녹이는 건가요?
단백질의 PI가 극단적으로 낮은 pH라면 활성을 위하여 그럴수도 있다고 생각하는데.. 저것은 좀.. 뭔가.. 잘 살펴볼 필요가 있다고 생각되는군요.
아! 제가 혼돈해서 Nucleolin으로 잘못 말씀드렸네요ㅠㅠㅠ
Recombinant Human PDGF-BB Protein입니다!
이론 pI값은 9.38이네요