안녕하세요 저는

고마바이오텍의 Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit 제품을 사용하려고 하는데 protocal 문의드립니다 

1. 분석하고자 하는 세포를 약1x106cells/ml로 준비한다.
2. 0.5ml의 세포 현탁(5x105cell/ml)을 microtube로 옮긴다.
3. 1000 x g로 5분간 상온에서 원심 분리하여 배양액을 제거한다.
4. 차가운 PBS 0.5ml로 세포를 부드럽게 풀어준다.
5. 1000 x g로 5분간 상온에서 원심 분리하여 PBS를 제거한다.
6. 차가운 1x binding buffer 0.5ml로 세포를 부드럽게 풀어준다.
7. 1.25ul의 annexin V-FITC를 가한다.
8. 반응물에 빛을 차단하고 상온에서 15분 반응시킨다.
9. 1000 x g로 5분간 상온에서 원심 분리하여 상층액을 제거한다.
10. 차가운 1x binding buffer 0.5ml로 세포를 부드럽게 풀어준다.
11. 10ul의 propidium iodide를가한다.
12. 반응물을 빛을 차단하고 냉장 보관한다 (4℃)
13. 빠른 시간 내에 유세포분석 (flow cytometry)또는 형광현미경으로 분석 한다.

7. .25ul의 annexin V-FITC 양을 늘려도 될까요?

compensation 하니 fitc가 너무 적게 잡혀서요

annexin v 다른 키트는 1:1 비율로 pi fitc 넣는 것 같아서요