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 전체 > Molecular Biology-DNA > Transformation
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질문 vector transforamtion
올챙이Worker(대학원생)  | 06.24 17:13

안녕하세요.

vector transformation 중에 문제 있어서 이렇게 질문을 남깁니다....

 

addgene에서 pMo130 vector를 주문해서 E.coli XL1-BLUE에 tansformation을 시도했는데....colony가 하나도 안 나왔습니다.......

그 이후에 vector의 양을 늘려서 한 번더 시도해봤는데...안 되네요....

이 vector는 XL1-BLUE에 transformation하면 안 되는 vector인가요??

transformation할 때는 항생제로 kanamycine LB plate를 사용했습니다.

이게 잘못된 것은 아니죠??.......

사이트에 들어가면 JM109에 하라고 적혀있기는 한데....저희가 지금 그 균주를 구매할 수 있는 상황이 아니라서요....

E.coli XL1-BLUE 말고는 E.coli DH5a 만 있는 상태입니다...

E.coli DH5a에 시도해보면 나올까요??....

cloning 고수님들 답변 부탁드려요....

 

11347_map

#vector
 
#transformation
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
123  |  06.24 18:13   

competent cell은 멀쩡한 상태인가요?

대왕개구리강시  |  06.25 10:45  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

벡터 맵으로만 봤을 때, 클로닝용 대장균은 어느것도 상관 없을 것 같습니다.

실험실에 확실한(?) 다른 벡터가 있으면 그것을 같이 아무 대장균에나 transformation 해 보세요.

두 개 다 colony가 안나오면 comp cell이 문제가 있느 것이고,

다른 벡터는 colony를 만들지만 pMo130만 colony 가 안나오면 벡터의 문제겠지요. 그러면 구입한 벡터를 100ng 정도 아가로스 젤에 걸어서 농도도 확인 해 보시구요.

 

올챙이Worker  |  06.25 18:31  
실험할 때 다른 벡터도 같이 transformation을 시도했는데 pMo130 벡터만 colony가 생성되지 않았습니다ㅜㅜㅜㅜ일단 아가로즈 젤에 내려서 확인해봐야겠네요ㅜㅜㅜ..그러면 내려서 확인해보고 농도를 조절해야하는 걸까요?ㅜㅜㅜㅜ
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