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질문 세포실험 물질 처리 시 pH 문제
알글씨야(대학원생)  | 06.23 15:44

안녕하세요.

세포주를 이용한 기능성평가 실험 중 문제가 생겨 문의드립니다.

시험물질 처리 시 최종 농도에서 pH가 11까지 올라가는 경우 pH를 7.4 수준으로 맞춰줄 수 있는 방법이 있을까요??

버퍼를 사용하여 stock을 만들면 어느정도 완충이 될까하여 물질을 PBS에 녹여서 처리해보기도 하고, 세포배양배지에 바로 녹여서 처리해봐도 pH가 너무 높아요.. 

이 경우 HCL을 이용하여 적정을 해야할까요?

좋은 아이디어나 경험이 있으시면 조언 부탁드립니다.

#세포배양
 
#약물처리
 
#pH
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  06.23 15:46  

- 시험 물질의 stock pH 조정이 안되나요?

개구리Naive  |  06.23 16:04  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

혹시 Stock solution 농도가 처리 농도의 몇배정도 되시는지요?

저같은 경우는 전에 실험할때 일단 최대한 고농도로 Stock만들고

그럼에도 처리시에 pH가 내려가면 growth medium에 sodium bicabonate로 적당히 버퍼링을 해주었습니다.

알글씨야  |  06.23 16:07  

답변감사합니다.

stock pH 조정을 HCl로 하면 되는 걸까요??
사실 이 부분도 문제가 되는게 당장 사용할 수 있는 시료양이 넉넉하지 않아서 최종 처리 농도의 100X 기준으로 600 μL 정도밖에 만들지 못할 것 같습니다..

그래서 배지로 좀 더 희석해서 (pH 측정가능한수준으로) pH를 맞춰줘야하나 고민하다가 방법이 있을까하여 질문드리게 되었습니다. 
 

stock은 100X로 준비하여 최종 볼륨의 1% 처리되었습니다.

대왕개구리SPEED  |  06.23 17:39  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

- HCl로 맞추면 됩니다.

 

- 처리 시약의 경우 보통 부피가 적은 경우가 많기 때문에 정확히 pH를

맞추지 않고 pH paper로 중성으로 맞춰도 무방합니다.

 

- pH 보정 후 필터를 하면 됩니다.

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