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 전체 > Molecular Biology-Protein > Western Blot Analysis
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질문 Western blot에서 단백질이 새는듯한 모습이 나옵니다
알졸업시켜줘요(대학원생)  | 06.22 20:06

upload_image

HaCaT Cell에서 c-Jun 발현 양상을 살펴본 웨스턴 결과입니다.

이렇게 주변부분이 다 한줄처럼 보이는 양상으로 나옵니다.

이런 현상이 전기영동시 갤이 터져서 단백질이 새어나오는 것이 원인일 수 있다는 글을 봤는데,

이 멤브레인을 스트리핑 해서 다른 팩터를 찍으면 또 잘 분리돼서 정상적으로 나옵니다.

1차 항체를 새로 희석해서 써봤는데도 이렇게만 나오면 1차항체 제품이 오래되거나 상태가 이상해진게 맞는걸까요?

항체가 워낙 비싸다보니 이거 하나 다시 찍자고 다시 사기도 참 애매하구 ㅎㅎ... 혹시 제가 잘못한 부분이 있다면 원인이나 점검해야할 점을 아시는 분 계실까요?

#western blot
 
#1st antibody
 
#gel
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
456  |  06.22 21:10   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

sample을 1/3정도로 희석하고, loading volume도 1/2정도로 줄여서 loading해보세요. 

대왕개구리SPEED  |  06.22 23:21  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.
젤이 터지는 현상은 없습니다.

전기영동 문제이므로 시료 부피를 조금 줄여 보세요.
알졸업시켜줘요  |  06.23 09:27  

두분 다 답변 주셔서 정말 감사합니다 :-)
한번 시도 해보고 말씀드리겠습니다 !!

알필1  |  06.24 15:18  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

버퍼도 바꾸세요.~

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