실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > Purification/Isolation
miniprep sol3 관련 질문
레벨2 해태 (대학생)
안녕하세요 miniprep 관련 질문드립니다.
제가 얼마전에 prep을 하면서 마지막 elution을 30 uL정도로 했는데 최종 DNA volume이 100 uL가 정도가 나왔더라고요. (제가 마지막 ethanol washing 후 잔여 ethanol을 완벽히 제거하지 않아서 였습니다.)
따라서 DNA만 다시 분리하고자 elution 용액(DNA+DW+ethanol)에 miniprep sol3 용액을 과량 섞어준 뒤 다시 prep column에 내렸거든요. (제가 알고있는 이론으로는 DNA가 column에 붙은 원리가 pH때문이라 알고있어서 sol3랑 섞어주면 column에 잡힐 거라고 생각했습니다.)
그런데 다시 elution 하니까 DNA recovery가 하나도 되질 않았더군요.
혹시 이유가 무엇있까요? 짐작가는게 없어서 질문드립니다.
원래부터 DNA 양이 적었던건 아닙니다. column에 다시 내리기 전에 DNA 농도를 측정했었는데 ethanol이 섞여있긴 해도 DNA농도가 적지는 않았었거든요.
답변 주시면 감사드립니다.
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