[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
한국애질런트
배너광고안내
이전
다음
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3 배너4
배양육 연구동향: Meat the Future
전체보기 안전점검 LABox
 전체 > Molecular Biology-Protein > Western Blot Analysis
조회 254  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 western blot 밴드가 안뜨는 이유가 궁금합니다
알스뚜(대학원생)  | 05.31 15:39

western blot으로 p16을 확인하려고 했으나 밴드가 아예 뜨지 않았습니다.

bv-2 cell 에서 처리를 하여 cell lysate를 얻었고 이걸로 western blot을 진행하였습니다. 

제가 항체를 cell signaling의

p16 INK4A (D3W8G) Rabbit mAb #92803 를 사용하였는데요

 

1 antibody를 mouse로 사용하지 않고 rabbit 으로 사용한 것이 영향을 미칠 수 있나요? 

2 bv 2 cell 에서 p 16을 확인한 논문이 있어서 발현이 되는게 맞는데 무엇이 문제일까요 

3 밴드가 아예 뜨지 않고 하얀색입니다.. beta actin 은 뜨는데 왜그럴까요 ? ㅠㅠ 

#p16
 
#western blot
 
#protein
답변하기
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리지나가는 생물학자  |  05.31 15:47  

BV-2 cell은 mouse.... #92803 항체는 human용

나오는게 정상이 아닌데요... 이정도는 확인을 하고 실험을 진행하셔야.....

개구리영빙구  |  05.31 16:04  

저도 일단은 윗분의견에 동의하면서(mouse-human이 맞지않음) 답변드릴께요

1. mouse든 rabbit이든 2차가 무엇인지는 그렇게 차이가 나지 않습니다 회사가 다르거나 개체의 차이에 의해서 antibody가 별로일수는 있겠지만요
2. 그 논문에서 사용한 antibody가 질문자님이 사용하신거랑 같은 것인가요?
- 같은거라면 그 논문이 잘못되었거나 datasheet에는 human용이지만 가끔 mouse도 잡을수는 있습니다(일반적으로 후자는 아닐 가능성이 큽니다)
3. antibody 특이성이 안맞는거 같습니다

123  |  05.31 18:26   

2nd antibody는 어떤 걸 쓰셨나요?

1st Ab host를 Rabbit 쓰신 후에

2nd Ab를 anti-rabbit이 아닌 다른 걸 쓰시면 안 나옵니다.

답변하기
할인행사/신제품신기술 광고 검색광고
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
[TECAN 한국공인대리점] TECAN Microplate reader/ IMPLEN Nanophotomet.. (12.31까지)
바이오닉스 바이오닉스
[TECAN No.1 공식대리점] 2주년 고객 감사 이벤트_20% 한정 세일 판매 (9.30까지)
인성크로마텍 인성크로마텍
[Newomics] M3 Emitter®: LC-MS 감도 향상을 위한 마이크로플로우 LC-나노스프레이 이온..
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
Celloger Mini Plus를 사용하여 세포 수준의 모든 실험을 처리해보세요!
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
[TECAN한국공인대리점] 22주년 TWO-TWO 맞이 할인이벤트_liquid handler 실험실 자동화.. (12.31까지)
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
전자동 DNA/RNA 추출 장비
최근등록   더보기 >
생1 실험 주제   08.19
특정 관심 유전자에서 보고된 SNP를 검색할 수 있는 database   08.19
이미다졸50mM 100mM 250mM 만드는법?   08.19
샘플 및 독성 물질 처리 후 시간 기준   08.19
FRAP assay 결과값 정리   08.19
가수분해물 단백질분말 관련 질문있습니다.   08.19
인간각막상피세포(Human Corneal Epithelial Cell) 가지고 계신분 있으...   08.19
면역침전 stst3 dimer 형성   08.19
Sio2 표면에 bonding된 APTES 제거하는 방법   08.19
TEM image sampling   08.19
최근답변자 우수답변자
개구리크옷

알CUMB

알아미노펜

앞다리oneday

대왕개구리SPEED

알크리스12

알대학원졸업희망

올챙이슬픈달걀

대왕개구리SPEED

개구리Daegu*

개구리flu...

대왕개구리안재진

꽃개구리TX

꽃개구리bio

꽃개구리개그

개구리propadrum

실험관련연재
세오 연재중실전 실험 프로토콜 101
세오 (필명) (Cincinnati Children’s Hospital Medical Center)
곽민준 연재중랩노트
곽민준 (POSTECH 생명과학과)
신코 연재중분석장비 이야기
분석장비 탐험가 (필명) ((주)신코)
박은총 연재마감후배에게 주고 싶은 면역학 노트
박은총(Duke University)
Mr.S 연재마감의학계의 Spectaculum: 임상시험
Mr. S (필명) (연세대학교)
에스프리 연재마감실험을 해봅시다
에스프리 (필명)
이제욱 연재마감생명과학자 기초체력 다지기
이제욱 (오송첨단의료산업진흥재단, 신약개발지원센터)
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
써모피셔사이언티픽 광고