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Cryosection (frozen section) 도와주세요
레벨2 Starflower (과기인)
안녕하세요 Starflower입니다.
Cryosection이 잘 안되서 이렇게 질문드립니다.
Mouse whole brain을 coronal 방향으로 section 하려합니다.
오늘 사용한 sample의 경우 제가 만든 sample은 아니지만
PBS, 4%PFA로 관류 후 30% sucrose에 두고 가라앉힌 다음
드라이아이스에 에탄올을 넣고 oct compound로 굳혀 만든
sample로 알고 있습니다.
그리고는 -80도에서 보관하고 있었고, cryostat에서 1시간정도 두어
온도를 맞춰줬습니다.
mold가 너무 커서 면도칼을 이용해서 주변 oct 정리 좀 한 뒤
section을 하니까 문제가 발생 했습니다.
문제는 크게 4가지 입니다.
1. 조직과 함께 oct가 계속 말립니다.
2. 절삭할 때 쭈글쭈글하게 나옵니다.
3. oct와 함께 붙어 나오지 않고 조직과 분리됩니다.
4. slide glass에 붙일 때 bubble이 너무 많이 들어갑니다.
바로 slide glass에 붙이는 방식으로 하려는데 이러한 문제들이 있습니다.
어떻게 하면 고칠 수 있을까요
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