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젤을 반대 방향으로 놓으신거 아닌가요? 전류 흐르는 방향의 반대방향으로요
sample이나 ladder가 사라지는게 2가지 정도가 있긴한데
1. sample이 새는 경우
gel 만들때 넣는 comb가 gel을 생각보다 깊이찍었거나 기포가 끼어서 아래 구멍이 생기는 경우가 조금씩 있습니다 유독 ladder만 사라진다면 새고있을 가능성이 있습니다
2. 전기영동시 (+),(-)를 반대로 하는경우
사진을 보니까 화질의 문제인지는 모르겠는데 well에서 위로 가는 느낌이 드네요 혹 전하를 반대로 껴서 sample이 먼저 빠지는건 아닌지 의심이 됩니다
제 생각에는 위 2가지정도로 생각드는데 다른 고수님들의 생각도 들어보심 좋을듯합니다
아직 작동시키지 않은 상태인 것 같은데
gel caster와 tray 사이에 air가 끼거나 하면 tray가 바닥에서 붕 뜨면서 comb가 gel을 관통하게 됩니다.
gel 만든 후 위쪽의 측면부를 살펴보면 comb가 gel을 뚫었는지 확인할 수 있습니다.
comb 조립 시 지지대쪽에 휴지를 조금 깔아서 여유있게 조립하는 방법도 있습니다.
- gel 사진은 원하는 부위만 찍지 말고 gel 전체를 찍는 것이 문제점 해결에
좋습니다.
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skdus173@naver.com
(비회원)
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22.05.30 14:35
반대로 한게 아닌데 저러네요ㅠㅠ 몇 번 더 해보도록 할게요
plasmid DNA를 분리정제할때, 마지막 단계에서 ethanol ppt나 washing 단계에서 이 ethanol 을 완전히 제거하지 않으면 well에 넣자마자 well 바깥쪽으로 순간 사라져 버립니다.
spin down을 하거나 잠시 DNA pellet을 건조시켜서 ethanol을 제거하면 저런 현상이 없어집니다.
ladder만 거신건가요?? 아니면 PCR product를 거신건가요?
ladder만 로딩하셨다면 젤 만들때 구멍이 뚫렸을 확률이 가장 높아보입니다.
PCR product라면 premix를 쓰셨나요?
혹시 premix가 아니라면 loading dye는 시판용 제품을 쓰시나요? 만들어서 쓰시나요?
제품을 구매해서 쓰실 것 같지만 혹시라도 만들어서 쓰신다면 glycerol의 양이 적어서 샘플이 가라앉지 못할 때 저렇게 보였답니다.