실험 Q&A Cell Biology > Transfection
CRISPR-Cas9 하시는 선배님들 질문 드립니다
레벨2 도비가공짜 (대학원생)
안녕하세요 선배님들
저는 현재 석박통합 3년차 진행중인 도비이고 CRISPR-Cas9을 이용한 genome editing 실험을 하고 있습니다
CRISPR-Cas9으로 iPSC에 교정해서 라인 제작을 계속 하고 있는데, Donor Vector를 이용하여서 HDR을 진행할때 매우 높은 효율이 나왔고 라인 확보가 되게 쉬웠습니다.
그 다음으로 다른 라인을 제작하는 중 ssODN으로 디자인이 가능하여 진행을 하였으나 효율이 너무 극악으로 나오는 것 같더군요.
Donor Vector로 진행한 경우는 X Chromosome내 유전자 교정이었고 XY의 cell line이라 더 효율이 높게 나온 듯 하지만
ssODN으로 진행한 것은 hetero도 잘 안나와서 질문 드립니다.
ssODN으로 하는 건 원래 효율이 낮은가요?
낮다면 ssODN을 double strand DNA로 합성해서 진행하는 것이 좋을지 질문 드립니다.
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