실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Western Blot
웨스턴고수님들!! ) 모든 샘플에서 동일한 잡 밴드가 떠요!! help
웨스턴 미오 (비회원)
웨스턴시 모든 샘플에서 35kDa 쯤 동일한 밴드가 뜹니다. 다른 밴드(타겟) 도 잘 나옵니다. 혹시 항체문제인가 싶어서, 다른 샘플도 전체 멤브레인 걸어보니 다른 항체로요. 역시 35쯤에서 진한 밴드가 뜹니다. 워싱 심하게 해줬더니, 밴드가 expose 진하게 된것 처럼, 눈에 노랗게 타버렸네요 버퍼오염인가 해서, (sample buffer제외하고) 전기영동, 트랜스퍼 버퍼, aps, TEMED등은 모두 바꾸었는데. 역시 마찬가지네요. 단순히 워싱이나 BLOCKING (5% BSA in TBST: 1시간) 문제가 아닌것 같아요. 샘플버퍼문제일까요? 죽겠네요..ㅠㅠ.. 보고자하는 밴드는 잘 뜨는데, CONSTRUCT 사이즈가 다 달라서, 홀 멤브레인 다 봐야거든요...ㅠㅠ. 도와주세요
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