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 전체 > Microbiology > Bacteria
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질문 항균성 유산균 실험 질문드립니다!2
올챙이예비대학생(일반인)  | 05.15 17:37
첨부파일 파일첨부: 1652603655158.jpg (367 KB)
이미지 첨부파일

pH 맞추고 상등액 따서  disc없이 먼저 검정균 접종한 배지에 3ul 점적하였는데 

균이 자란건지 환이 생긴건지 애매해서 질문드립니다! 환인가요??

#유산균
 
#항균성
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
남홀  |  05.15 18:17   

음... 글쎄요ㅜ 맞는거 같긴 한데 스피드님께 자문을 구하는게 어떠신지..

대왕개구리SPEED  |  05.15 18:17  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

- 어떤 배지인가요?

 

- 원심분리해서 유산균 배양액만 사용했나요?

 

- 약한 환이 보입니다.

올챙이예비대학생  |  05.15 18:19  

LB배지  S. aureus 검정균입니다.

원심분리해서 상등액만 점적했습니다 !

 

대왕개구리SPEED  |  05.15 18:35  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

- 상등액을 pH 보정을 했다면 억제 환이 맞습니다.

 

- 단, 첨부 사진의 결과를 보면 균이 자란것으로 보입니다.

 

- LB배지에서 유산균이 거의 자라지 않을 겁니다.

 

- 만약 흰 원부분이 균체가 맞으면 산으로 억제된 것입니다.

 

- 첨부 사진에서 환이 보이는 균만 다시 배양해서 pH 보정 -> 원심분리 ->

0.2um 필터를 한후 균체를 완전히 제거 후 억제환을 확인해 보세요.

 

- 억제 환으로 보이는 시료의 균이 유산균은 확실한가요?

올챙이예비대학생  |  05.15 18:55  
첨부파일 파일첨부: KakaoTalk_20220515_184952518.png (565 KB)
이미지 첨부파일

- 상등액을 pH 보정을 했다면 억제 환이 맞습니다.

보정했습니다.

- 단, 첨부 사진의 결과를 보면 균이 자란것으로 보입니다.

원 밖으로 투명해 보이는 것이 환으로 보이는건가요?

 

- LB배지에서 유산균이 거의 자라지 않을 겁니다.

자국의 형태로는 남던데 이번에는 다르게 보입니다!

 

- 만약 흰 원부분이 균체가 맞으면 산으로 억제된 것입니다.

아! 그렇군요

 

- 첨부 사진에서 환이 보이는 균만 다시 배양해서 pH 보정 -> 원심분리 ->

0.2um 필터를 한후 균체를 완전히 제거 후 억제환을 확인해 보세요.

 

필터를 하라는 말씀과, 균체를 제거는 이해를 못하겠습니다.

4도에서 냉장 보관한 상등액을 다시 사용했을 경우 정확도(재현성)가 떨어질까요?

 

- 억제 환으로 보이는 시료의 균이 유산균은 확실한가요?

우선은 강아지 분변에서 분리한 균입니다. 아직 균의 동정은 하지 못했지만 BCP test에서 양성, Catalase test에서 음성, Gram staining에서 양성으로 판정되었고 유산균이 아닐까 생각하고 있습니다.

대왕개구리SPEED  |  05.15 19:02  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

- 0.2um 피터를한하는 것은 원심 상등액으로는 균체 제거가 100% 되지 않기

때문에 균체 제거를 100% 하기 위해서입니다.

 

- 첨부 사진의 환이 나온 균을 몇일 배양해서 배양액 pH가 어느 정도

나오나요 ?

올챙이예비대학생  |  05.15 19:16  

- 0.2um 피터를한하는 것은 원심 상등액으로는 균체 제거가 100% 되지 않기

때문에 균체 제거를 100% 하기 위해서입니다.

 

그렇군요 처음 알았습니다!! 필터 후 다시 한번 실험해 보겠습니다.

 

- 첨부 사진의 환이 나온 균을 몇일 배양해서 배양액 pH가 어느 정도

나오나요 ?

37도에 24시간 정도 배양하였고 배양액의 pH는 칼슘카보네이트로 맞췄으며 

100개 의상의 균을 실험하고 있기 때문에 정확히는 모르지만 대략 6~6.4정도로 예상하고 있습니다. 

대왕개구리SPEED  |  05.15 19:38  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

- 어떤 균인지 모르는 상태에서 분리한 균종에서 유산균을 대상으로

실험하려면 최소한 배양액 pH를 확인해야 합니다.

 

- 실험 순서에 문제가 있고 최소 pH4.2~4.5정도는 나와야 합니다.

 

- 다른 균은 안자라고 1개만 LB에 자랐으니 아마도 유산균이 아닐것으로

보입니다.

 

- 분변에서 균을 분리할 경우 대부분 장내세균이고 일부 유산균일 겁니다.

올챙이예비대학생  |  05.15 23:15  

말씀 항상 감사합니다speed님!

스승의날을 빌어 감사합니다 존경합니다! 

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