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질문 IHC-P dab 염색 질문
알철철대왕(과기인)  | 2022.05.12 18:10
첨부파일 파일첨부: 그림1.tif (389 KB)

파라핀 섹션으로 dab staining 을 하는데요~

첨부사진과 같이 얼룩이 나타나는 현상이 있습니다.

처음에는 signal 인줄 알았는데, control tumor 조직이나 약물처리 tumor 조직이나 antigen retrieval 을 하나 안 하나 안티바디의 종류에 상관없이 무작위로 나타났다가 없다가 하더라구요. 

wash 문제같기도 한데 똑같은 날 똑같은 tissue, 똑같은 protocol 로 염색을 해보면 2장중에 1장은 저런게 나타나는 경우가 자주 있습니다.

혹시 이유를 아시거나 이 문제를 해결하기 위해서 조언을 부탁드리겠습니다.

저만 이런 상황을 겪은건지도 궁금하네요

#IHC
 
#얼룩
 
#염색
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
뒷다리BU  |  2022.05.21   

예쁘게 스테이닝이 꽤 잘 된 것 같은데 뭐가 문제라는 건가요?

 

점들?

 

당신이 스테인 하는 단백질이 puncta를 만들 수 있어요?

그런지 아닌지 알아요 몰라요?

그게 아니고 그냥 artifact인지 알고 싶은거에요?

스테인을 하면 cytoplasm vs. nuclear 둘 중 어디에 있어야 하는데요?

세포 바깥에 점 같이 존재할 수도 있어요 없어요?

알철철대왕  |  2022.05.30   

답변 감사합니다.

제가 사용한 안티바디 정보와 레퍼런스를 검색해보니 저런식의 펑타는 못봤거든요. 기대하는 시그널패턴은 분명히 아닙니다.

설명드린 것처럼 안티바디 종류와 조직에 상관없이 규칙성이 없이 나타나는 부분이고 고배율로 자세히 보면 알갱이 같은 것이 뭉쳐있는 느낌입이라 artefact 일거라 보고 있습니다.   

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