실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > Purification/Isolation
plasmid를 추출해야하는데 choromosomal dna isolation을 했는데 plamid를 정제하는 방법이 있을까요?
레벨2 수박고구마 (대학원생)
제가 정신을 놓고 있다가...
plasmid를 E.coli transformation하고, plasmid를 추출해야하는데, choromosomal dna isolation을 해버렸는데 이 dna에서 plamid를 정제하는 방법이 있을까요?
혹시나 해서 첨언하자면 저희 랩에서는 plasmid 추출은 kit를 사용합니다.
choromosomal dna isolation protocol은 하기에 적혀있는대로 시행했습니다..
도움 주시면 감사하겠습니다 ㅠㅠ
* Tip을 이용해서 glass beads가 cell pellet보다 아래로 내려갈 수 있도록 섞어줌
* STES : 0.5M NaCl, 0.2M Tris-HCl (pH 7.5), 0.01M EDTA, 1% SDS
* 하층액이나 흰색 막이 섞여 들어가지 않도록 주의 -> PCR 효율을 저해할 수 있음
Dissolve it into 50ul~200ul 1X RW (restriction buffer containing 20ug/ml RNaseA)
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