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지하철 문 통과해서 들어갈 때 앞에 사람이 있다면 어느 정도 방해를 받죠?
transfection이 일어날 때 FBS가 진로 방해 한다는 느낌으로 이해하시면 될 것 같습니다.
지하철 문 통과하듯이 FBS가 없는 게 transfection 효율이 더 좋기 때문에 serum-free media를 사용합니다.
그리고 transfection 후 어느 정도 시간 주고 다시 complete media로 change해주지 않나요?
Optimem에 5% serum 넣으셔야 하는걸로 알고있습니다. 플라스미드 complex를 만들때는 serum이 들어가있으면 제대로 안만들어져서 serum free Optimem으로 준비하지만, HEK cell culture할때 serum을 아예 빼면 세포가 다 바닥에서 떨어질 가능성이 큽니다. 보통 suspending HEK 세포를 만들 때 serum을 빼주는데 serum이 세포 부착에 필요합니다.
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바이오솔릭스
(비회원)
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22.05.10 10:40
안녕하세요.
유전자 전달체 연구개발 기업 (주)바이오솔릭스 입니다.
당사는 pDNA, siRNA, mRNA 등 다양한 핵산 전달체를 전달하는 제품을 국산화 하기 위해 연구 개발 중이며, Solfect 시리즈의 제품을 출시 하였습니다.
일반적으로 다수의 transfection 시약은 cationic, 핵산은 anionic charge를 띄고 있어서 charge interaction으로 lipoplex를 형성하게 됩니다.
Serum에는 albumin이 상당 부분을 차지하고 있으며 anionic charge 를 띄고 있어서 transfection 시약과 결합을 저해 합니다. 따라서 Opti-MEM에서 Lipoplex를 제작 하는 것을 추천합니다.
다만 Tranfscetion 실험 당시 media change는 transfection reagent, 세포주 등에 따라 조금 씩 차이가 날 수 있습니다.
당사에서는 세포 부착력이 약한 HEK293T 같은 경우 미디어 체인지를 하면서 유실 되는 세포가 상당 수 있을 수 있으므로 기존의 배지를 교체 하지 않고 Lipoplex를 첨가하는 방식으로 추천 해 드리고 있습니다.
또한 새롭게 개발한 transfection 시약 (solfect series)는 일반적으로 FBS가 있는 media에 처리 하여도 무방 합니다.
무료 샘플을 원하시거나, Transfection에 관한 의문점이나 프로토콜, 기타 유전자 전달에 관련된 전반적인 실험에 고민이 있으시면 support@biosolyx.com 으로 연락 부탁 드립니다.
바이오솔릭스 드림