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질문 ELISA(chicken serum) 결과 해석 좀 도와주세요..
알notorious choi(과기인)  | 2022.04.28 10:59
첨부파일 파일첨부: (report)211018 chicken serum(P).pdf (63 KB)

안녕하세요. 

CUSABIO사의 kit를 이용하여 standard와 측정하고자 하는 chicken serum(Male, 1/10dilution Male, Female, 1/10dilution Female)을 이용하여 ELISA를 진행하였습니다.

 

참고로 sheet에 competitive enzyme immunoassay technique이라고 써있는 걸 보아 competitive ELISA로 유추하였습니다. 

 

MPM6.exe 프로그램을 이용하여 흡광도를 측정하였으나, 실험결과를 해석하는 데 어려움이 있어 도움을 구하고자 합니다.

첨부파일 확인 부탁드립니다.

1. report 상단에 4-parameters Fit이라고 하여 나온 식은 어떻게 나오게 된 것이며, X, Y, A, B, C, D 값은 어떻게 구해진 것인지 궁금합니다.

 

2. chi2와 RMS는 무슨 의미인가요?

 

3. standard report에서 말하는 Std#, Conc, SD, %CV은 무엇인가요?

만약 %CV가 변동계수를 뜻하는 것이라면 샘플 결과에는 왜 안 나오나요?

 

4. data analysis report의 Conc, SD(Conc)의 의미와 구하는 방법을 알고 싶습니다.

 

5. 또한 앞에 (1/10)이라고 표기된 것은 1X 혈청 원액을 증류수9혈청1로 희석한 것인데 왜 dilution 한 것과 원액의 흡광도가 크게 차이나지 않는 건가요?

 

6. Conc에 (+)라고 뜨는 이유와 SD(Conc)에 (*)이라고 뜨는 이유가 궁금합니다.

 

마지막으로 원래 그래프는 샘플을 제외한 standard만 그려지는 건가요?

질문이 많아 죄송합니다. 

#ELISA
 
#competitive ELISA
 
#IMMUNOASSAY
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
올챙이SS58  |  2022.04.28   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

1. report 상단에 4-parameters Fit이라고 하여 나온 식은 어떻게 나오게 된 것이며, X, Y, A, B, C, D 값은 어떻게 구해진 것인지 궁금합니다.

: 4-parameter logistic curve를 구글에서 검색하셔서 보시면 됩니다. 

2. chi2와 RMS는 무슨 의미인가요?

: 카이제곱검정, root mean square 검색해보시면 됩니다.

 

3. standard report에서 말하는 Std#, Conc, SD, %CV은 무엇인가요?

만약 %CV가 변동계수를 뜻하는 것이라면 샘플 결과에는 왜 안 나오나요?

: std# 스탠다드 넘버, Conc 입력한 스탠다드 농도, SD 표준편차, %CV 변동계수, 변동계수는 계산도 간단하니 직접하세요. 근데 보통 한농도는 3반복으로 하는게 좋습니다. 2반복은 오류가능성이 높아요. 

 

4. data analysis report의 Conc, SD(Conc)의 의미와 구하는 방법을 알고 싶습니다.

: 스탠다드로 계산한 검량선을 바탕으로 추정한 농도값과 그 값의 표준편차입니다. 자세한건 구글링해보시면 나옵니다.

 

5. 또한 앞에 (1/10)이라고 표기된 것은 1X 혈청 원액을 증류수9혈청1로 희석한 것인데 왜 dilution 한 것과 원액의 흡광도가 크게 차이나지 않는 건가요?

: 그래프로 한번 그려서 비교해보세요.

 

6. Conc에 (+)라고 뜨는 이유와 SD(Conc)에 (*)이라고 뜨는 이유가 궁금합니다.

: 스탠다드 범위에서 벗어났고 SD값이 프로그램 세팅값 이상인 것 같네요. 스탠다드를 다시 잘 잡고 한 샘플당 3반복으로 해보세요

 

마지막으로 원래 그래프는 샘플을 제외한 standard만 그려지는 건가요?

프로그램 세팅이 그렇게 되어 있지 않나요? 시그마플롯이나 그래프패드프리즘으로 그려보세요.

알notorious choi  |  2022.04.29   

감사합니다!

 

선생님이 말씀해주신대로 보완해서 다시 해보겠습니다.

 

정말 감사합니다

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