실험 Q&A Microbiology > Yeast
yeast 고정후에 fitc labeling 할 수 있나요?
해동 (비회원)
보통은 고정전에 yeast에 있는 primary amime에 fitc를 붙이는데 (이건 실온에 두면 labeling이 아주 잘됩니다.) 실험과정상 yeast가 세포(Macrophage)에 attacthment한 후에 세포와 yeast를 고정시킨후 fitc labeling을 해야되는 상황입니다. 걱정거리가 두개인데 첫번째는 glutaldehyde나 paraformaldehyde로 고정시키면 yeast에 있는 amine에 어떤 영향을 줘서 labeling이 되지 않을까 고민이고, 두번째는 세포고정후에 fitc용액을 세포와 한시간 두면 fitc가 세포안으로 들어가지 않을까 걱정입니다. 세포 밖에 있는 yeast에만 fitc를 붙여야 되거든요. fict는 0.1M carbonate 버퍼(pH9.5) 에 녹아있습니다. yeast외에도 PLL같은 폴리머도 같은 목적으로 사용예정인데... 고수님들의 도움 부탁드립니다.
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