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PCR의 문제보다는 일단 전기영동의 문제 같네요
아래쪽에 형광?을 봐서는 Sample이 loading되지 않은거는 아닌듯하고요(새는거 같은걸로요)
전기영동시에 쓰이는 buffer 사용한지 오래되었나요? 그렇다면 한번 갈아주고 진행해보세요(새 buffer라면 다른 trouble shooting을 생각하셔야됩니다)
아니면 (확신은 없지만)TAE의 문제정도?
marker가 뜨지 않았다면 전기영동 스텝에서 문제가 생겼네요
버퍼 새로 만들어서 준비하시고
power supply에 따로 연결하는 gel tank라면 gel running 전에 음극 양극 제대로 연결했는지 한 번 더 확인하시고 시작하세요.
- PCR과 전기영동은 질문자가 직접 했나요?
- primer와 loading dye 2 band가 보이기 때문에 전기영동 문제는 아닐
가능성이 높습니다.
- ladder는 확실히 loading이 되었나요?
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레벨3
jeongjjangii
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22.04.07 09:52
발색을 나타내는 물질은 사용하셨나요?
gel 과 running buffer에 EtBr을 사용하거나
sample에 DNA gel loading dye(6X)를 섞는거요.
아니면 (-)에서 (+)쪽으로 샘플이 running하도록 방향은 잘 잡으셨는지요?
검정색 쪽에 레더와 샘플을 로딩하시고 빨간색 쪽으로 running되도록 해야합니다. 저는 Run to Red로 외었어요~
레더까지 안나온것으로 봐선 전극방향을 잘못했을 가능성이 가장 높은거같아요.
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레벨5
mediflower
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22.04.11 09:48
ETBR 바꿔보세요.
로딩다이는 보이는데 DNA가 안보이는건 ETBR염색이 안되었을겁니다.