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레벨2
고구마말랭이
(대학생)
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22.04.04 21:49
Duoset ELISA human IL-6 제품입니다! (Cat. DY206-05)
저도 Duoset 제품 사용했었는데, 96 well plate기준 well당 100 ul씩 넣어서 사용합니다. 넣을때 물론 벽쪽으로 tip을 붙여서 넣고요. 딱히 tapping을 안해도 상관 없습니다.
elisa 하고 o.d값을 보면 standard의 4 point 정도의 well만 capture antibody가 well 바깥쪽에만 집중적으로 붙어있어요,.......
--> 이말이 구체적으로 의미하는바가 무엇인가요? well 바깥쪽에 붙어있는지 아닌지 판단이 어려울텐데 말이죠. 혹시 판단근거는 무엇인가요?
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레벨2
고구마말랭이
(대학생)
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22.04.05 18:04
Microplate 촬영을 area scan 하고 well 분포도? 같은걸 색 차이로 보는데 well의 바깥쪽의 색이 진하고 중간부분의 색은 옅게 나와서 교수님께선 제가 capture antibody를 골고루 못붙인거라고....
ELISA를 이용했으니, 최종적으로 steraptavidin-HRP와 substrate and stop solution을 이용해서 얼마나 노랗게 변하는지 OD값으로 측정한거 아닌가요?
마지막에 stop solution 넣고, tapping 몇번하고 plate 1~2바퀴 돌려주면 well이 고르게 노란색으로 변하는데.....
well을 통째로 OD값을 측정하면 되는데, well안에서 area를 나누어서 측정했다는 건가요? 그렇게 측정할필요도 없고요. 설령 그렇게 측정했다는 값을 보여줄 수 있으신가요? ELISA를 많이 해봤지만 이해할 수가 없내요.