실험 Q&A Microbiology > Yeast
논문관련 유기산
레벨1 희건루 (대학원생)
팽이버섯의Listeria monocytogenes의 온도별 생존과 유기산에 의한 저감화효과를 알아보는 논문인데요...
사용균주에 대한 설명입니다..
여기서 말하는 rifampicin 이 항생제를 말하는게 맞을까요?
균주를 5개를 사용하였다고했는데..
균주를 Tryptic Soy Agar 배지와 tryptic soy broth 배지에 접종한 이유가 뭘까요?
TSB-YER배지인거 같은데 이건 다른 배지인가요?
그리고 마지막에 PBS라는 생리심염수에 재현탁한 이유는 뭘까요..
미생물관련 논문을 많이 접해보지못해서 재료랑 방법이 너무 어렵습니다..
전체적인 논문 해석이 너무 여려운 대학원생입니다...
한번만 도와주세요 ㅠ0ㅠ
L. monocytogenes 사용균주 팽이버섯에서 L. monotytogenes의 생존을 조사하기 위하 여 팽이버섯에서 분리된 L. monocytogenes 5균주를 사용 하였다. 시료 중 존재하는 background microflora의 생육 을 억제하고 팽이버섯에 존재하는 미생물과 구분하기 위 하여 본 연구에 사용할 L. monotytogenes에 rifampicin 저 항성을 유도하였다. Rifampicin 저항성 유도는 0.6% yeast extract가 함유된 tryptic soy agar (TSA-YE; Oxoid, Basingstoke, Hampshire, England)상에서 배양한 각 균주를 1 loop 취하여 50 µL/mL의 rifampicin (R; Biosesang, Sungnam, Korea)과 0.6% yeast extract가 함유된 tryptic soy broth (TSB-YER, Oxoid, England)에 접종하고 37o C에 서 24시간 진탕 배양하였다. 이후 50 µL/mL의 rifampicin 과 0.6% yeast extract가 함유된 tryptic soy agar (TSAYER; Oxoid, England)에 접종하고 37o C에서 24시간 배양 하여 rifampicin 저항성 균주를 얻었다. Rifampicin 저항성 균주는 20% glycerol을 함유하는 TSB-YER를 사용하여 - 70o C에서 보관하였다. 사용 시에는 상온에서 해동한 후 각 각 10 µL를 취하여 7 mL의 TSB-YER에 접종 후 30o C에 서 18시간 동안 배양하였다. 배양된 균은 각각 4,500 rpm 에서 15분간 원심분리 한 후 상등액을 제거하고 phosphate buffered saline (PBS; Difco Laboratories, Detroit, MI, USA)에 현탁하였다. 이후 4,500 rpm에서 15분간 원심분 리 한 후 시험균을 PBS에 재 현탁하였다. 이후 5균주를 동량 혼합하고 생균수가 6 log CFU/mL가 되도록 희석하 여 본 연구에 사용하였다.
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