실험 Q&A Immunology > ELISA
도와주세요!!!! ELISA real-time PCR 결과 차이,,,제발 도와주세요!!!!!!
레벨2 sjsj3636 (대학원생)
Raw264.7 cell을 이용하여 TNF-a, IL-1b, IL-6 발현량을 측정하고 있는데요,
세포는 LPS감작 및 물질처리를 진행했습니다.
PCR의 경우, Cell only보다 물질처리한 cell pellet에서 발현량이 더 낮아질만큼 슈퍼물질로 나왔습니다.(물질 모든 농도에서)
LPS감작(물질처리X)은 잘 됐습니다.
그래서 맞는 데이터인지 비교하기 위해, ELISA를 통해서 발현량을 측정했는데,
IL-1b의 경우, PCR만큼 크게 낮아지지 않았고 높은 농도에서만 발현량이 줄어들었고
TNF-a와 IL-6같은경우에는 발현량이 너무 높아 흡광도값이 측정되지 않습니다.
ELISA 역시, LPS 감작은 잘되었구요,,,
이런 경우, 어떻게 데이터를 봐야할까요?,,,
두 실험이 이렇게 차이가 나는 이유는 무엇일까요??
제발 도와주세요,,,,ㅠㅠㅠ
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