안녕하세요
실험실에서 HT-29 CELL을 이용해서 IL-8 실험을 진행하고 있는데 CONTROL 값이 너무 높게 나와서 질문드려요.
CELL SEEDING은 96WELL에 1*10^5으로 200ul 씩 분주해서 24H 배양하고, SAMPLE 처리후 LPS처리를 진행하고 20H 뒤에 ASSAY를 진행하는데 SAMPLE 값은 잘 나오는데 CONTROL이 높게 나와서 결과가 -값이나옴니다.
CELL이 문제가 있어서 CONTROL이 높게 나오는 걸까요?
LPS처리시간이 길어 높게 나오는 걸까요?
CELL이 문제가 있다면 제가 RAW CELL만 하다가 이번에 HT29 를 시작했는데 계대할때 0.25% tripsin을 처리해서 진행하는데 계대 후에 관찰해 보면 바닥에붙어있는 cell도 있고 부유하고 있는 cell도 꽤 관찰이 되는데 cell 이 문제가 있는걸까요? mtt 도 진행해 봤을때 세포가 죽지는 않거든요...
아니면 원래 ht-29를 이용해서 IL-8을 관찰할때 CONTROL이 높게나오는걸까요? LPS랑 어느정도 값 차이가 나면 괜찮은 실험결과를 얻었다고 할 수 있을까요?
그리고 HT-29 CELL상태가 계대후에 부유셀이 있는게 맞을까요?
답변 주시면 감사드려요.^^
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