실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Western Blot
ImageJ를 이용한 Protein quentification에 관하여 질문드립니다.
레벨1 대학원 도비 (대학원생)
안녕하세요. 이제 막 학위를 시작한
파릇파릇한 대학원생입니다.
선배님들께 여쭤보고 싶은 것이 있어
글을 남기게 되었습니다.
제가 총 9개의 protein을 W/B하여 p38 밴드를 관찰한 결과
4번 Line에서 밴드가 연하게 나왔습니다.
이를 해결하기 위해
전체 밴드를 image J로 수치화 (background X)하였고 positive 단백질 수치를 기준값 "1"로 두었습니다. (positive 값 / positive 값)
나머지 밴드의 경우는 ( 밴드 값 / positive 값 )을 통해 대비값을 구했습니다.
이 때 4번 라인은 0.2 정도가 나왔습니다.
그렇다면 혹시 W/B 재실험 시 해당 4번 단백질을 5배 정도 넣어 준다면 밴드가 나머지 밴드와 동일하게 나타나는 것이 제 생각이고 이 때 실험의 data는 p38의 밴드가 동일하게 나타난다면 p-p38에 대한 실험을 진행 시 논란이 없다고 생각합니다.
혹시 이렇게 단백질의 양을 조절해도 괜찮을까요?
감사합니다.
Bio마켓 프리미엄