실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Western Blot
sds-page, transfer band 휘어짐 원인
레벨1 LylLyl (대학생)
안녕하세용 3월 입학을 앞둔 인턴입니다.
western blot을 하고 있는데 sds-page 후 ponceau S staining에서 다음과 같은 결과를 얻었습니다.
왼쪽은 각 sample간 intensity가 동일하게 깔끔하게 잘 나오는데 오른쪽은 sample간 intensity도 다르고 marker부터 들쭉날쭉합니다. gel이 어땠는지 기억나지 않아서 sds-page에서 생긴 문제인지 transfer과정에서 생긴 문제인지 모르겠습니다.
왼쪽, 오른쪽 모두 동일한 날에 제조한 page gel을 사용하였고 모든 실험재료, 과정이 동일합니다. 그런데 두 가지가 다르게 나오니까 정말... 원인을 모르겠습니다. 혹시 이런 현상(?)을 겪어본 분이 계시다면 조언 해주시면 감사하겠습니다.
참고로, PAGE gel은 12% separating gel, 5% stacking gel이고 110V, 약 2시간 running했습니다. Transfer는 110v, 3시간 했습니다.
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