엑소좀을 isolation 할때

FBS와 AA가 안들어간 basal media만 있는 배지로 배양한 세포를 회수하여 엑소좀을 추출하잖아요?

부유세포는 그냥 파이펫에이드로 회수하여도 상관없습니다만,

그럼 만약에 adhesive 한 세포의 경우에 회수를 어떻게 하나요?

계대배양 할때는 기존 배지를 전부 석션하여 버리고, tE를 2~3ml 쳐주어 떼어내는 것으로 알고있는데요.

혹시 엑소좀 isolation 할때도 1)배지 석션 후 2)tE 처리하고 3) contrifugation하여 상층액 전부 빨아내고 4) basal media 넣어서 파이펫팅 해준뒤에 5) 다시 순차적으로 contrifugation 해서 엑소좀 추출하나요?

만약 그렇다면 2),3) tE 처리한거 contrifugation 하는 과정에서 상층액에 엑소좀 많이 섞여있을텐데 이걸 버리나여?? ㅠㅠ

자세히 좀 알려주심 감사드리겠습니다 ㅠㅠ