실험Q&A를 통해 여러분의 지식을 나누어 주세요. 답변을 등록하시려면 로그인 해주세요.
본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
-
Jessica
(비회원)
-
09.02.23 14:01
FISH 관련한 실험은 원리는 같지만 시약의 brand 마다 방법에 있어서 차이가 있습니다.
제가 아는 brand는 Kreatech 이라는 brand 인데, 여기는 labeling kit 구성이 이해하기 쉽게 되어 있습니다.
Probe의 sequence를 PCR 등의 방법을 통하여 amplification 한 후에
PCR product를 이용하여 labeling 진행 후 (이 때는 물론, labeling kit에 있는 protcol대로 하시면 되죠) in situ hybridization 을 수행하는 단계로 이뤄질 것으로 정리가 되겠네요.
말씀하신 hybridization 방법은 대략 다음과 같은 과정으로 진행이 됩니다.
1. Specimen (실험 대상 slide -- 미리 슬라이드에 조직이 붙어 있어야겠죠, 이 때 formalin fixed paraffin embeded(FFPE) tissue인지, frozen 조직인가에 따라서 pretreatment step에서 차이가 있습니다) 준비.
2. Pretreatment
frozen vs. FFPE
3. Denaturation and Hybridization
(온도가 가장 중요한데, 이 온도는 probe에 따라서 결정되게 됩니다. )
4. Post treatment
(보통은 rapid wash method를 사용합니다)
5. Counterstain and Fluorescence microscope analysis
(filter 파장은 probe의 fluorescence 에 따라서 결정해야 합니다)
(FITC labeled probe이면 FITC filter 를 사용...)
FISH 라는 실험방법은 주로 병원에서 진단검사용으로 많이 사용하고
한국에서 가장 유명한 브랜드는 Kreatech 과 Vysis가 있습니다.
Research part에서 쉽게 사용할 수 있는 제품은 아무래도 kit 화 되어 있는
제품일텐데, kit는 Kreatech brand도 잘 되어 있습니다.
이 정도면 안내가 잘 되었나요?
더 궁금하신 사항 있으면 연락 주세요.
-
레벨1
Jessica
-
09.02.23 14:02
FISH 관련한 실험은 원리는 같지만 시약의 brand 마다 방법에 있어서 차이가 있습니다.
제가 아는 brand는 Kreatech 이라는 brand 인데, 여기는 labeling kit 구성이 이해하기 쉽게 되어 있습니다.
Probe의 sequence를 PCR 등의 방법을 통하여 amplification 한 후에
PCR product를 이용하여 labeling 진행 후 (이 때는 물론, labeling kit에 있는 protcol대로 하시면 되죠) in situ hybridization 을 수행하는 단계로 이뤄질 것으로 정리가 되겠네요.
말씀하신 hybridization 방법은 대략 다음과 같은 과정으로 진행이 됩니다.
1. Specimen (실험 대상 slide -- 미리 슬라이드에 조직이 붙어 있어야겠죠, 이 때 formalin fixed paraffin embeded(FFPE) tissue인지, frozen 조직인가에 따라서 pretreatment step에서 차이가 있습니다) 준비.
2. Pretreatment
frozen vs. FFPE
3. Denaturation and Hybridization
(온도가 가장 중요한데, 이 온도는 probe에 따라서 결정되게 됩니다. )
4. Post treatment
(보통은 rapid wash method를 사용합니다)
5. Counterstain and Fluorescence microscope analysis
(filter 파장은 probe의 fluorescence 에 따라서 결정해야 합니다)
(FITC labeled probe이면 FITC filter 를 사용...)
FISH 라는 실험방법은 주로 병원에서 진단검사용으로 많이 사용하고
한국에서 가장 유명한 브랜드는 Kreatech 과 Vysis가 있습니다.
Research part에서 쉽게 사용할 수 있는 제품은 아무래도 kit 화 되어 있는
제품일텐데, kit는 Kreatech brand도 잘 되어 있습니다.
이 정도면 안내가 잘 되었나요?
더 궁금하신 사항 있으면 연락 주세요.