간세포에 oleic acid와 palmitic acid를 처리하여 지질 축적 유도 실험을 진행하고 있습니다. 오랜 기간 진행하고 있는데 유도가 전혀 안돼요ㅜㅜ
배지에 aggregation 되어서 떠다니더라구요..
1. 여러 논문들에서 BSA와 결합을 시켜야한다고 하던데 결합시키는 과정이 꼭 필요한가요??
2. BSA와 결합시키지 않고 지질을 축적시키는 방법이 있을까요??
혹시 관련 실험에 대해 아시는 분이 계시다면 답변 부탁드립니다ㅜㅜㅜ
혹시 oleic acid랑 palmitic acid를 어떤 solution에 녹여서 처리했을까요??
잘 녹여서 처리해야합니다!
100% ethanol에 녹여 100mM stock을 만들어 사용하였습니다.
BSA와 꼭 결합시키셔야 합니다
안그러면 FFA가 안녹고 계속 aggregation됩니다ㅠㅠ
BSA처리 안하시려는 이유가 뭘까요? 실험상 들어가면 안되는지요?
논문들 찾아보면 더 자세히 나오긴 할텐데
일단 저희랩에선 low glucose DMEM+1%BSA (w/filtering) 에 FFA 섞어 media change 해줍니다.
FBS 들어가지 않아요 serum free로 진행해야 합니다.
혹시 또 궁금하신거 있으면 댓 달아주세요
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실전 실험 프로토콜 101
후배에게 주고 싶은 면역학 노트
