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웹진 Vol.24, No.10 (2022년 10월) 발간
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 전체 > Laboratory Animals > In Vivo Imaging
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질문 근육세포재생의 정량적 평가법 관련해 문의드립니다.
알박사학위좀따자(과기인)  | 01.12 14:01

안녕하세요. 학위 연구로 세포 조직 관련 실험을 시작한 초보연구자 입니다.

 Nude mouse의 전경골근(ant. tibialis m.)을 손상 모델을 이용해 근육세포 재생에 관한 연구를 진행중입니다.

손상된 근육 조직을 추출한 뒤 면역형광(IF)염색법을 이용하지 않고, 근육세포의 (myofiber) 재생 능력을 평가할 수 있는 방법이 있을 지 궁금합니다.

주된 평가 항목은 새롭게 재생된 근육세포 수 계측 및 재생면적(Cross-sectional area) 측정입니다.

현재 선행 연구에서 면역형광 (IF) 염색을 시행하지 않은 상태로 조직 절편을 확보해 표본 slide를 제작해 놓은상태입니다. 면역형광(IF)염색법을 이용하지 않고, 기존에 만들어 놓은 H&E stain slide를 이용해 위 결과를 수동적 혹은 자동 측정할 수 있는 방법에 대해 문의드려 봅니다.

ImageJ라는 open acess tool을 이용하는 논문도 보긴 했는데, 대부분 면역형광염색을 시행한 절편을 대상으로 하는 것 같고,,,,혹시나 가능하시다면 무료/유료 프로그램이나 방법에 대해 알고 계시면 꼭 부탁드립니다ㅠㅠ

감사합니다.

#quantitation
 
#muscle regeneration
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
뒷다리Vaydor  |  02.08 09:27  

같은 내용이라고 할수는 없지만 sarcopenia model 관련연구를 좀 보시면 될 것 같습니다. sarcopenia는 근육을 구성하는 근섬유가 감소하는 병으로 질문자님이 하는 연구와 다를 순 있습니다. 몇가지 관련 논문을 찾아보았는데,

ref. Magnoliae Cortex Alleviates Muscle Wasting by Modulating M2 Macrophages in a Cisplatin-Induced Sarcopenia Mouse Model

약간의 실험적인 오류들이 보이는 실험/논문이지만 일단 accept 된 논문이기에 ref 해보시길 바랍니다. (해당 lab 선행연구들을 한번 찾아보시길 바랍니다.)
해당 논문 fig.3E 에서 H&E 염색을 하여 TA muscle 조직 부분을 수동적으로 직경? 길이를 재서 확인을 하였습니다.
cross-sectional area (CSA) analysis


Image J open acess tool을 사용해서도 가능할 것 같긴합니다만
이것으로는 근육세포 수 계측 정도만 가능할 것 같네요. H&E image도 동일하게 사용 가능합니다.  

어려우시다면 image를 한번 줘보세요. 제가 한번 해보록 하죠. (쪽지주세요)

 

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