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 전체 > Cell Biology > Cell Culture
조회 1139  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 oleic acid
알cell culture77(대학원생)  | 2021.12.18 12:07
안녕하세요.
HepG2 세포에 지방 유도 실험 진행하려고 합니다.
FFA로 sigma-oleic acid (O1008)을 구입하였는데.. viscous liquid 형태라 어떻게 해야하는지 모르겠어요.
녹이는 방법과 세포에 처리하는 법이 궁금합니다!!
혹시 관련 실험을 해보신 분이 계시다면 답글 부탁드려요ㅜㅜㅜㅜㅜ
#hepg2
 
#oleic acid
답변하기
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  2021.12.18   

EtOH에 녹여서 사용하는 방법과 sonication해서 emulsion상태로 사용하는

방법이 있습니다.

알cell culture77  |  2021.12.19   
그냥 viscous liquid에 EtOH를 넣으면 되나요? 그럼 1ml를 넣어야할까요..?? 혹시 조금 더 자세하게 알려주실 수 있을까요??ㅜㅜㅜㅜㅜ
대왕개구리SPEED  |  2021.12.19   

시료의 처리 농도는 실험자가 정확히 알고있을건데 어느 농도로 처리하나요?

알cell culture77  |  2021.12.20   

최종 농도가 1mM이 되도록 처리하고 싶습니다...

대왕개구리SPEED  |  2021.12.20   

시약을 만드는 단계에서는 working 보다 stock 농도가 중요하고 필요합니다.

알cell culture77  |  2021.12.20   

stock 농도는 20nM 정도로 만들고, treat는 1mM 농도로 처리하고 싶습니다...

그리고 BSA와 결합을 꼭 시켜야 할까요??

모르는 부분이 많아 자꾸 질문드립니다.ㅜㅜㅜ

알그린포비돈  |  2021.12.22   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

저희 랩 프로토콜로는 

HepG2 cell에 지방축적 시키는 실험에선 

100% EtOH에 100mM로 stock 만든 후 1mM이 되도록 처리합니다. 

media는 no FBS/1% BSA 쓰셔야 합니다. 그래야 OA가 BSA와 conjugation되어서 녹아요.. 아니면 안녹고 aggregation 됩니다.   

control군에 EtOH treat해주시는거 잊지 마시구요~ 

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