실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
RT-PCR 시에 no RT control에서 band가..
RT-PCR (비회원)
실험하면서 너무 한참을 안 풀리는 문제가 있어서 이런저런 시도를 하다가 글을 올리게되었습니다..(DNA 전기영동 사진은 아니지만 제가 그린것으로 첨부파일 넣었어요. 확인부탁드립니다.) mamalian cell 로부터 Trizon로 TOTAL RNA를 EXTRACTION하였습니다. DNase처리를 한후 oligo dT를 이용하여 RT-PCR을 하였습니다. GAPDH PRIMER 로 no RT control과 함께 PCR을 하였는데 control에는 밴드가 뜨지 않아서안심하고 제 실험테마인 A gene specific primer 로 PCR 하였더니 CONTROL에도 원하는 size의 밴드가 떴어요.. 그래서 아예 다른 gene인 B primer로 PCR하였더니 GAPDH와 같은 결과가 나왔습니다. GAPDH와 PRIMER B 에서는 정상적인 결과가 나오나 PRIMER A 만 계속 NO rt control 에도 밴드가 뜹니다.. 제 생각엔 contamination이 된거 같은데 계속 같은 결과만 나오고 있습니다. 어떻게 해결해야 할지 감이안잡혀서 글 올리게되었습니다. RT-PCR 고수님들 답변좀 부탁드려요..
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