실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Extraction/Isolation
hplc분석 관련 질문.. 왕초보입니다.
레벨1 lc분석왕초보 (일반인)
안녕하세요, HPLC 왕초보입니다.
최근에 HPLC에 대해 공부를 시작하게 되었는데..
혼자서 공부하려니깐 이해되지 않는 부분들이 너무 많아 답답함이 있어서요...!
1) 역상 컬럼
일반적으로 C18컬럼을 많이 사용하는데, C18컬럼은 소수성이 강한것으로 알고 있습니다. 그래서 소수성이 강한 물질을 분석하게 되면, 소수성 상호작용을 하기 때문에 더 천천히 내려오는 것으로 알고있습니다.
그렇다면, 소수성이 강한 물질을 분석할때는 C18, 친수성이 강한 물질을 분석할때는 C8이나 C4를 사용하는게 맞나요?
어떤 제품 자료를 읽어보면 C4컬럼인데
"낮은 소수성 컬럼으로 소수성이 매우 강한 분석물질에 대한 탁월한 머무름 및 분리" 이런식으로 기재가 되어있어서 헷갈리네요..ㅠ
2) C4컬럼
일반적으로 폴리펩타이드나 단백질분리할때 SEC컬럼도 사용하지만 역상 컬럼도 사용하는 것으로 알고있는데, 단백질의 크기가 클수록 C4, 작을수록 C18컬럼을 사용한다고 하죠..?
그 이유를 잘 모르겠습니다.
C18와 C4는 소수성의 차이만 있는게 아니었나요?
단백질의 크기에 따라 분리하려면 pore size를 확인해야하는게 아닌가요..?
왜 단백질 크기가 클수록 C4 컬럼을 사용하는지요?
제 지식이 너무 짧아서, 너무 기초적인 질문들일 수 있는데..
혼자 공부하다보니깐 이 이상 진도가 잘 나가지 않네요 ㅠㅠ
도와주시면 감사하겠습니다!
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