실험 Q&A Mol. Biol.-RNA > Purification/Isolation
RNA extraction과 RNA 농도
레벨1 미묘 (대학원생)
안녕하세요 질문이 있어 글을 씁니다.
우선 저는 cell에서 RNA 추출하는 실험을 했습니다.
현미경 관찰시에 cell 수가 많았음에도 불구하고 chloroform을 넣고 centrifuge를 한 뒤에 pellet이 보이지 않았지만, 추출 후 nanodrop으로 농도를 측정했을때 260/280, 260/230 값도 나오고(purity는 안좋게 나왔긴 합니다) 농도도 측정이 됐습니다.
그런데 real time pcr시에 증폭이 안돼서 agarose gel에 RNA를 내려봤더니 아무 밴드도 뜨지 않았습니다.
그래서 질문은 pellet이 없었던게 RNA가 추출이 안됐던거라면, RNA가 없어도 260/280, 260/230, 농도 값이 나올 수가 있나요? 제가 chloroform을 넣고 voltexing하지 않고 pipetting만 해줬는데 그래서 추출이 잘 안됐을 수도 있는건가요?
답변 달아주시면 정말 감사하겠습니다.
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