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 전체 > Molecular Biology-Protein > Extraction/Isolation
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질문 e.coli 에서 protein 추출할 때 어떤 buffer를 사용해야할까요ㅠㅠ
올챙이eogkrtod(대학생)  | 2021.10.21 09:19

e.coli에서 단백질을 뽑아야하는데 저희 실험실에서 제가 거의 처음해보는 거라 물어볼 선배들도 없고요ㅠ

 

검색해보니 sonication이 젤 간단한 protocol인거같은데..

어떤 buffer에 resuspension 시켜야할까요.. PBS를 사용해도 괜찮은가요? 

 

#e.coli
 
#protein
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  2021.10.21   

- 단백질 사용 용도에 따라 조금 달라질 수 있습니다.

 

- sonication에 사용하려면 중성 buffer면 모두 사용가능합니다.

protease inhibitor를 첨가하기도 합니다.

 

- 전기영동만 하려면 lysis buffer를 사용해도 됩니다.

개구리szzang  |  2021.10.21   

PBS로 하셔도 됩니다.

단백질 실험 관련해서 발현 정제 조건을 잡는 실험을 하시겠네요.

어떤 스트레인에 어떤 벡터가 들어가 있는지에 대한 정보가 있으면 좀 더 도움이 될텐데 단편적으로 질문을 올리셔서...

발현 정제 조건 실험을 할때는 온도나, IPTG농도 등 여러 조건을 잡고, buffer는 Tris base buffer와 phosphate base buffer 두가지로 해서 단백질 전기영도으로 패턴을 보고 정제 실험을 진행합니다.

단백질 정제 서비스 해주느 업체 홈페이지에도 어느정도 정보가 있고, 요즘은 단백질 정제 관련 책도 많이 나와 있습니다.

웹상에도 정보가 많이 있으니 공부해 보시면 도움이 될듯합니다.

좋은 실험하세요~

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