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레벨1
Vanguard0524
(대학원생)
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21.09.01 19:02
chloroform에 Tris를 녹일 수 있다는 말씀이신가요? 아니면 Tris 버퍼를 chloroform과 섞어서 pH를 맞춰야 한다는 말씀이신가요?
안녹기 때문에 satrated라는 용어를 사용합니다.
중성 phenol 만들 때 처럼 여러번 혼합하면 pH가 변합니다.
chloroform-saturated 0.05 M Tris–HCl (pH 7.7) .
먼저 0.05 M Tris–HCl (pH 7.7) 을 만듭니다.
동일 부피의 chloroform을 첨가하고 심하게 흔들거나 voltexing 한 다음 그 chloroform을 취해서 다시 동일 부피의 0.05 M Tris–HCl (pH 7.7)을 넣고 같은 방법으로 mix 해 줍니다. 이 과정을 saturation 이라 하는데, chloroform을 0.05 M Tris–HCl (pH 7.7)로 saturation 한다는 의미입니다.
chloroform 분자 사이의 빈 공간을 0.05 M Tris–HCl (pH 7.7)로 채워준다는 의미인데, 이렇게 saturation 안한 chloroform으로 어떤 용액에 처리하면 그 용액 중의 물이 chloroform 중으로 들어가 버리면서 용액의 부피가 줄어들고 salt 농도가 증가하는 등의 결과가 나옵니다. 이것이 chloroform아니 phenol을 saturation을 하는 의유입니다.