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질문 IP 결과값 해석에서 잘모르겠어서 질문올립니다!
알direo(대학생)  | 2021.08.18 13:46

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위 결과값에서 input은 positive control 인 것까지는 이해를 했는데 
상단의 IP:AKT의 경우 면역침전을 진행하고 이후에 pull down assay를 통해 단백질의 유물를 확인한다는 것인지 궁금합니다. ㅠ 

아래의 밴드를 보면 IP:AKT를 한 용액을 가지고 또다시 IP와 WB를 진행했을 경우의 밴드가 나온것인가요?

#IP
 
#input
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
꽃개구리bio  |  2021.08.19   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

WB는 IP 전 sample IP는 IP 이후 sample을 이야기 하는 것으로 보여지는데요.

AKT로 IP를 하면 binding partner인 다른 protein target antibody로 잡아야 할텐데 왜 IP:AKT WB:AKT를 했는지 모르겠네요. 혹시 다른 fig에 다른 antibody로 잡은 data가 있나요? 아니면 mtAKT를 잡지 못하는 antibody에 대한 실험인가요?

그런데 data에 대한 신뢰가 좀...

OE sample에서 크게 overexpression이 된것으로 보이지 않고 

sepharose (bead)는 IP에서는 하얗게 지워진 흔적이 보이는데요.. ㅜㅜ

알direo  |  2021.08.19   

논문 주제를 봤을때 CTD-AKT결합을 확인하는 실험이라서

mt 했을때 IP값이 CTD에 결합하는 AKT 가 줄어든다. 이걸 보여주고 싶은 실험 같습니다. 

답변 감사합니다!! 많은 도움 되었어요 !!!

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