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 전체 > Molecular Biology-DNA > Purification/Isolation
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질문 DNA purification / Gel electrophoresis 질문
알교스라이팅(대학원생)  | 2021.08.02 17:50
첨부파일 파일첨부: dna.png (640 KB)
이미지 첨부파일
안녕하세요 박사없는 연구실 석사생입니다.

환경 DNA를 추출하고 있는데 생각보다 Biomass가 적은지 detection이 잘 되지 않습니다.

Nanodrop으로 확인하면, 5~12ng/µl 정도 나오는데 A230 peak가 너무 높게 나오고 A260/A230 농도가 굉장히 좋지 않습니다.

그리고 Gel electrophoresis를 하면 band가 확인되지않습니다....

미치고 팔짝 뛸 노릇인데 좋은 해답을 가지신 분이나 tip이 있으신분이 계신가요?

실험은 Q사와 M사 kit를 사용하며, elution 양은 50µl로 내립니다.



Q1. A230 peak down method

Q2. Gel electrophoresis no band issue

훌륭하신 연구자 분들의 답변 기다리겠습니다.

Ps.gel electrophoresis에 control이랑 ladder는 잘 확인됩니다.


#DNA extraction
 
#A230
 
#Gel electrophoresis
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  2021.08.02   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

현재 정량한 양은 흡광도에서 측정하는 오차 범위의 수치 이기 때문에 

DNA가 없다고 봐야 합니다.

A230보다 A260을 올려야 하고 현재 상태에서는 전기영동에서 band는 

안나옵니다.
테리  |  2021.08.03    

 

A260/A280이 1.8 이상 퀄리티여야하고.. 농도가 일단 너무 적은것 같습니다.

어떤 DNA인진 모르겠지만 DNA extraction 부터 다시해보심이 어떨까요. 키트를 바꿔보세요.
개구리차몬드  |  2021.08.03   

kit가 오래되어서 그러지 않을까요?

그리고 elution buffer 양을 줄여서 추출하시면 농도가 더 높아질거에요!

저는 30ul로 elution합니다.
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