실험Q&A를 통해 여러분의 지식을 나누어 주세요. 답변을 등록하시려면 로그인 해주세요.
본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
어떤 배지를 사용하나요?
- Raw 264.7 세포를 배양중입니다.
: 계대 배양에 사용한 배양중인 세포는 문제가 없나요?
터졌다고 했는데 죽어서 lysis되거 아닌가요?
-
레벨5
1st_Philekorea
-
21.08.01 17:38
필코리아테크놀로지입니다.
정보가 많이 부족합니다. 상황을 알려주시면 좋겠습니다.
개인적으로는 파우더 배지를 이용하여 배지용액을 만들어 사용한 적이 있습니다.
이때, 3차수를 autoclave하여 조제 후 filtration을 진행하였습니다. 그러나 3차수를 autoclave없이 조제 후 filtration을 진행하여 사용했을 때, 세포가 죽는 현상을 경험한 적이 있습니다.
이와 같은 상황은 아닐 것이라 생각되며, 말씀드린 이유는 어떤 상황을 정확하게 말씀해주셔야 답변드릴 때, 원인을 생각하여 답변드릴 수 있습니다.
재질문글 작성해주시면 답변드리겠습니다.
그 외 생각해볼 수 있는 내용
1. Aseptic technique
2. genlte manipulation (지나친 거품 생성 등...)
3. 배지 성분 (배지 중 L-glutamine, FBS 미추가 등..)
4. 배지 종류 (원래 키우던 배지가 아닐경우 adaptation 필요)
5. 배양기 (CO2, 온도...)
6. Thawing 문제 및 안정화 passage없이 진행 (stress)
감사합니다.
필코리아테크놀로지
http://www.philekorea.co.kr/
터지는 이유가 다양한데 왜 터지냐고 하면 할말이 없습니다.
정보를 더 주세요 배지를 뭘 쓰는지 어떤식으로 계대를 했는지 등등
raw 세포가 많이 예민하다고 알고 있습니다.
충격에 예민하여 sub하는 과정에서도 세포 변형이 일어나거나 죽는경우가 많아 조심해야 합니다.
또한 윗분들같이 이유가 많아 매사에 조심하는것이 최선입니다
보통 cell culture는 pbs로 wash하는데...pbs를 안 넣은 그냥 DW면 터질것같습니다.
배지 정보내에 osmolarity 확인해보시고, 직접 측정도 해보세요.