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 전체 > Molecular Biology-Protein > Expression/Purification
조회 497  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 재조합 단백질 overexpression 뒤에 supernatant에도 재조합 단백질이 있나요?
알Vanguard0524(대학원생)  | 2021.07.15 12:18

vector를 BL21(DE3)에 넣고 IPTG를 첨가 후overexpression을 하고 있습니다. 제가 궁금한건 overexpression 뒤 원심분리를 돌린 후 cell을 깨기전 제거하는 supernatant에 제가 원하는 재조합 단백질이 있는지가 궁금합니다. 원래는 cell을 깨고 purification을 하는데 그냥 간단히 activity를 보고 싶어서 supernatant를 이용해 볼까 합니다....

#purrification
 
#overexpression
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  2021.07.15   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

일반 vector로는 분비되지 않습니다.

세포내에서 soluble 또는 insoluble로 발현되는데 insoluble로 발현되면

활성이 없습니다.

soluble로 발현되더라도 활성이 없는 경우가 있기 때문에 발현과 활성 유무는

별개로 보고 활성은 측정해 봐야 알수 있습니다. 

추가로 대장균에서 분비 vector를 사용해도 sup.보다는 periplasmic space에

모여 있는 경우가 많습니다.

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