실험 Q&A Mol. Biol.-RNA > Purification/Isolation
RNA 정량 계산식이 왜 이런지 알려주실 분...ㅠㅠ
레벨2 Crea (대학원생)
안녕하세요. 1년차 대학원생입니다.
지금 PCR RNA추출을 하고 있는데요,
프로토콜에서 75% EtOH로 씻어주고 다 말린 뒤 15~20ul DEPC 를 넣으라고 나와있습니다. 그런데 저는 cell이 적어서 10ul를 넣습니다.
그 뒤 RNA 정량을 합니다.
저희는 spectradrop을 사용해 plate reader기에서 RNA 정량을 하는데,
계산 엑셀 파일이 따로 존재합니다.
그런데 RNA ug/ul 계산식이 260nm x 40 x 20 x 2로 되어 있습니다.
40은 RNA의 상수값, 20은 stectra drop 0.5mm cover glass여서 곱해주는데 남은 2는 희석배수인지 ... 그럼 왜 2인지 아시는 분이 계신가요?
그리고 10ul 을 넣었을 시 20ul을 넣었을 시 ug/ul 농도가 달라지는게 맞는데 계산식을 바꿔야 하는데 어떤식으로 수정해야 하는지 몰라서 여기에 여쭈어 봅니다 ㅠㅠ
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