실험 Q&A Plant Biology > Plant DNA RNA Isolation
High resolution melting 실험 실패
레벨1 식물분자 (대학원생)
제가 지금 분자표지를 개발하여 마커를 실험하고 있는데 잘되던 마커가 갑자기 안되기 시작해서 뭐가 원인인지를 모르겠습니다.
우선 DNA의 상태를 확인해봤는데 상태는 괜찮았습니다.
프라이머도 다시 새로 받아서 새 TDW에 희석하여 사용을 하였습니다.
HRM 칵테일은
TDW 1024
buffer 200
dNTP 100
primer-R 200
primer-F1 100
primer-F2 100
Taq 10
Syto9 50
입니다.
PCR은 2step에 95도 10초 60도 30초에 39사이클입니다.
평소에도 같은 조건으로 실험을 진행했을 때 문제는 없었습니다.
교수님 말씀으로는 TDW 문제일거 같다고 하셔서 TDW도 새걸 썼는데 결과는 같았습니다.
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