맨 왼쪽 사진은 세균은 아니지만 전형적인 곰팡이, 효모 형태도 아닙니다.
우선 오염원의 확인이 필요하기 때문에 slide glass에서 고배율로 한번 확인해
보세요.
또한 P/G외에 항진균제를 사용하는 것도 좋습니다.
오염은 항상 일어날 가능성이 있기 때문에 실험에 사용하는 기구, 장비의
소독 및 관리가 상당히 중요합니다.
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레벨1
경주심심이
(대학생)
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21.04.16 11:48
답변 감사합니다. 말씀주신대로 슬라이드 글라스를 찾아서 오염난 플라스크의 상층액만 관찰해보았습니다.
슬라이드를 광학현미경으로 x4 배로 본 사진이구요,
이 사진을 확대하면
까만 점들과 동그란 원 들을 발견할 수 있었으며,
x40 배로 확대해보았을때
이렇게 관찰 할 수 있었습니다. 세포는 멀쩡히 성장하면서 잘 붙어있으면서도 하필이면 저희가 필요한 상층액이 이러니 너무 환장하겠네여...
까만점들이 무엇인지도 궁금하고, 이렇게 세포 부착된 모니터링으로 보았을때 세포는 멀쩡하면서도 상층액만 뿌옇게 변색되는 이유가 정말 모르겠습니다.
답변자님과 지나가시는 모든 분들 중 경험해보신분이 있으시다면 꼭 확실치 않더라도 의견을 제시해주시면 감사하겠습니다 ㅠㅠ
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레벨5
Monochrom
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21.04.16 14:57
1. 일단 media 오염을 확인하기 위해 media만 들어있는 flask를 세팅해서 cell 과 같이 incubator에 넣어보세요
2. 본인의 테크닉 문제인지를 확인하기 위하여 다른 사람과 같이 동일한 배지와 동일한 cell 로 세팅하여 오염 여부를 확인해보세요
3. 가능성은 낮지만 bench의 필터의 교체 주기 및 air flow 작동 여부를 한번 확인해보세요 (업체 문의시 clean bench 내부의 particle 수 측정을 해보실 수 있을 것 같습니다.)
4. 혹시나 Yeast를 이용한 실험을 같이 하신다면 yeast 만지는 실험과 cell 실험은 다른 날 해보세요
5. micro-pipette을 이용하여 cell을 flask에 넣어주신다면 flask 내부나 입구 부분에 pipette 몸통 부분이 닿지 않게 신경써서 넣어서 세팅을 해보세요
(의외로 이부분에서 contamination이 일어나는 경우가 종종 있었습니다.)
말씀드린 방법으로 세팅한번 해보시고 원인을 찾으시길 바라겠습니다.
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레벨1
경주심심이
(대학생)
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21.04.16 15:14
답변해주셔서 정말 감사합니다. 알려주신대로 시행해보겠습니다.
1. 일단 media 오염을 확인하기 위해 media만 들어있는 flask를 세팅해서 cell 과 같이 incubator에 넣어보세요
-> 오늘 바로 시행해보겠습니다.
2. 본인의 테크닉 문제인지를 확인하기 위하여 다른 사람과 같이 동일한 배지와 동일한 cell 로 세팅하여 오염 여부를 확인해보세요
-> 같은날, 같은시간, 각자의 자리에서 같은 셀을 배양한 결과, 모두 상층액 오염이 발생 하였습니다. 인큐베이터도 같은것, 다른것 모두 사용했는데 모두 오염났네요...
3. 가능성은 낮지만 bench의 필터의 교체 주기 및 air flow 작동 여부를 한번 확인해보세요 (업체 문의시 clean bench 내부의 particle 수 측정을 해보실 수 있을 것 같습니다.)
-> 굉~장히 오래된 클린벤치 입니다. 참고하겠습니다.
4. 혹시나 Yeast를 이용한 실험을 같이 하신다면 yeast 만지는 실험과 cell 실험은 다른 날 해보세요
-> 네 유의하겠습니다.
5. micro-pipette을 이용하여 cell을 flask에 넣어주신다면 flask 내부나 입구 부분에 pipette 몸통 부분이 닿지 않게 신경써서 넣어서 세팅을 해보세요
-> pipet-aid를 주로 사용하고 있습니다만, 간혹 micro도 사용하고 있습니다. 참고하겠습니다.
(의외로 이부분에서 contamination이 일어나는 경우가 종종 있었습니다.)
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아이에스에스
(비회원)
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21.04.19 09:56
안녕하세요.
도움되셨으면 합니다.
해당 브로셔 참고 부탁드립니다.
감사합니다.