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MCHBSS 와 poly-L-lysine solution 코팅 도와주세요..ㅠㅠ ROS-NBT 실험
레벨3 타미 (대학생)
NBT환원으로 ROS를 측정하는 실험을 짜고 있습니다.
1. MCHBSS (modified complete Hank's balanced salt solution) 라고 되어있습니다.
이해하기로는 뭔가 첨가해서 완성되어진 HBSS를 뜻한다고 생각했는데..
실험에 참고하고있는 논문에는 딱히 성분이 써져있지않아서 더 찾아본 결과
MCHBSS containing 10 mM CaCl2, 3 mM MgCl2, 5 mM MgSO4, 24 mg ml−1 HBSS (Sigma). 라고 있더라구요.
10 mM CaCl2, 3 mM MgCl2, 5 mM MgSO4 를 HBSS 1X에다가 섞으면 되는걸까요?
24 mg ml−1 HBSS 이게 뭔지 모르겠습니다. 24mg/ml 이랑 같은말 같은데
HBSS 파우더를 또 구매해야되는걸까요 ㅠㅠ
다른회사꺼 HBSS 10X 액체시약이 있는데 그냥 이걸 써도될지...
2. 96well에서 cell 부착력을 주기위해 poly-L-lysine solution (0.2%,
Sigma) 을 100ul 처리하라고 되어있는데요.
찾아본결과 보통 sigma 포함 다른 회사들은 0.01% solution으로 많이 팔고 또 그걸 보통 더 희석해서 사용을 하시더라구요.
sigma에 파우더로도 있긴하지만 .. 이걸 0.2%로 만들어서 ( 즉 ml당 2mg 녹여서) 사용하는게 0.2% 라는건지..
아니면 지금 계산을 잘못하고 있는건지 모르겠습니다.
0.01% 솔루션으로 20ul만 96well에 바르는 프로토콜도 있던데
또 많이 치게되면 독성이 있고, 적당량을 발라야 한다고 하니
0.01% 솔루션으로 0.2%로 사용을 하라는뜻을 제가 잘못 이해하고있는건지 모르겠습니다. ㅠㅠ
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