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 전체 > Microbiology > Fungi
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질문 포자현탁액 제조에 대해 ~
실험녀  | 2009.01.15 11:09
답변있는 질문은 수정/삭제 불가(☞문의)
곰팡이의 포자 현탁액을 제조하는 방법에 대해 아시는 분은 답변 해주세요...
인터넷을 뒤져도 잘 나오지 않습니다..
주 전공이 미생물학이 아니라.. 어렵네요...
수고들 하세요^^
#포자 현탁액
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
실험남  |  2009.01.15    
포자현탁액 제조는 무척이나 쉽습니다...

우선은 곰팡이를 배양 해야 겠지요 고체배지에 도말을 한 후 적정온도에서 포자를 형성할때 까지 배양합니다. 포자가 형성이 되었다면 멸균수를 약 3 ml이상 plate에 분주하고 멸군된 백금이를 이용하여 긁어 냅니다 이렇게 긁어낸 포자액을 모아서 포자가 통과 할 정도의 크기의 필터를 이용하여 필터를 해줍니다 그런 원심을 하고 상징액을 버리고 가라앉은 포자에 20% glycerol를 일정량 분주후 현탁하여 -80에서 보관하시면 됩니다. 20% glyceol의 양은 포자의 양에 따라 틀려지며 너무 벅벅 하지도 너무 묽지도 않을 정도면 충분합니다. 이상 저의 경험을 바탕으로 설명 드렸는데 이해 하셨는지 모르겟네요...곰팡이 포자뿐아니라 포자를 형성하는 미생물에 대한 포자 현탁액 제조에 두루 쓰이게 되겠습니다.
실험녀  |  2009.01.16    
답변해주셔서 감사드립니다...
논문등을 봤을 때.. 너무 간단한 것이라 자세한 설명이 없는듯 하네요..
필터링을 할때에는 무슨 필터를 써서 해야하는지.. 보통 쓰는 WHATMAN 3M을 쓰면 되는지요... 또 한가지.. 원심분리를 할 떄 RPM은 얼마 정도로 돌려야 하는지 궁금합니다.. 하시는 실험 잘 되시길 바랄께요...
실험남  |  2009.01.16    
저는 필터를 직점 만들어서 했습니다.

주사기속에 솜을 주사기 바닥에서 약 2셑티 정도 되게 넣구 멸균해서 사용 햇습니다.

논문등을 보면 포자현탁액 제조시 필터에 대한 부분도 있을것입니다.

각 실험실의 시스템의 차이겠지만...전 그렇게 필터를 해도 포자가 잘 얻어졌거든요..

filter paper를 사용 하셔도 되구 저처럼 솜을 사용 하셔두 되구...아참 솜은 보송보송한 탈지면이나 이불속에 들어가는 솜을 저는 사용 하엿습니다.

단 filterpaper를 사용시에는 필터 넘버를 확인하세용 포자으 ㅣ크기보다 작은 홀을 가진 필터를 사용하면 포자가 하나도 얻어지지 않겠죠...^^*
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