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버퍼, 단백질이 많이 로딩된 웰에서 적게 된곳을 밀려서 확산된것이니 최소한 버퍼라도 각 웰에 동량을 로딩하세요
전기영동은 전기의 힘으로 단백질을 이동시키기 때문에 확산 현상은 나타나지
않습니다.
또한 well마다 동량의 부피를 loading하지 않아도 무방합니다.
1. gel은 직접 만들었나요?
2. 여러번 전기영동 해도 동일하게 내려가나요?
3. 백금선을 한번 확인해 보세요.
V를 줄여서 전기영동 해보고 비연속 gel을 사용해 보세요.
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레벨1
랜디스
(대학생)
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21.04.10 16:57
speed님/ 젤은 bid-rad 제품 구매해서 사용했습니다ㅜㅜ
테이프를 안 떼고 실험해서(테이프가 살짝 들린 채로 전기가 통해서 band가 나타난 것 같습니다) 그랬을 확률도 있을까요?
vertical slab gel은 탱크 중간쪽(가운데)에서 바깥쪽으로 전류가 통해야 합니다.
음전하가 젤을 통해서 위에서 아래로 내려가면서 SDS를 때려줘야 하는데, 중간에 절연체가 막고 있으면 안되겠지요..
젤 아래쪽 테이프를 제거하세요.
BioRad pre-made gel이 GTX던가?? 그거 맞나요? 제기억으론 200V 정도 지원하는데요.
150V 정도가 적당한것 같습니다.