실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Western Blot
웨스턴 관련 질문입니다
레벨2 slide (대학원생)
안녕하세요.
웨스턴 블랏을 실험중인 대학원생입니다.
제가 보아야 할 단백질들의 사이즈가 사용하는 항체 회사의 데이터시트랑 다르게 나와서 질문드립니다.
제가 보는 단백질은 Cysteinyl leukotriene receptor 1이고 폴리클로날 안티바디를 사용하고 있으며 데이터시트상에서 사이즈는 38kDa입니다.
그런데 실험을 진행하면 보시다시피 38kDa이 아닌 45kDa 이상에서 밴드들이 나오며 제가 원하는 경향성의 밴드들은 75kDa에서 나왔습니다.
또한 Cysteinyl leukotriene receptor 2 단백질의 경우 동일 샘플을 로딩하였을 때 (같은 회사의 폴리클로날 안티바디를 사용) 데이터시트상의 사이즈인 39kDa에서 나옵니다.
receptor1과 receptor2 둘의 사이즈가 차이가 많이 나는것도 이상하고, receptor1의 경우 데이터상에서의 사이즈가 나오지 않는 것이 궁금합니다.
샘플을 95도, 5분 cooking해서 만드는 데 receptor1에서 75kDa으로 나오는것으로 보아 receptor2에 비해 protein이 덜 잘려서 그런 것 아닐까?라는 생각도 듭니다.ㅠㅠ
어떻게 해야 receptor1의 사이즈를 데이터시트상에서 볼 수 있을까요...?