실험 Q&A > Buffer/Reagent
Genomic DNA 추출 시 lysis buffer의 조성
레벨5 GOHARD (대학생)
저희 실험실에서는 genomic DNA 추출 시 cell에 처리해주는 lysis buffer에
RNase A와 Proteinase K가 같이 들어 갑니다.
lysis buffer를 cell에 분주하고 ice 위에서 scraper로 긁어 준뒤 모아서
55도 heat block에서 30분 incubation하는데요
Proteinase K가 RNase A를 저해하지 않는지 궁금합니다.
검색해서 찾아보면 RNase를 먼저 넣고 반응 한 뒤, Proteinase를 넣기도 하고
Proteinase와 RNase가 공생?한다는 글도 있고저희 실험실에서는
genomic DNA 추출 시 cell에 처리해주는 lysis buffer에
RNase A와 Proteinase K가 같이 들어 갑니다.
lysis buffer를 cell에 분주하고 ice 위에서 scraper로 긁어 준뒤 모아서
55도 heat block에서 30분 incubation하는데요
Proteinase K가 RNase A를 저해하지 않는지 궁금합니다.
검색해서 찾아보면 RNase를 먼저 넣고 반응 한 뒤,
Proteinase를 따로 넣기도 한다는 곳도 있고
Proteinase와 RNase가 공생?한다는 글도 있고
RNase와 Proteinase를 lysis buffer에 같이 넣는데 37도에서
RNase를 활성화 시켜주고 55도로 온도를 높혀서 Proteinase를 활성화
시켜준다는 글도 있었습니다.
이 두개를 같이 넣어도 되는지, 또 위에 적은 사용 방법 중
뭐가 맞는 것인지 궁금합니다.
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