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SDS가 있기 때문에 sample buffer도 lysis가 됩니다.
단백질 정량이 안되기 때문에 적정 단백질 양을 loading하려면 예비 실험이
필요합니다.
cell solution A ul = protein B ug을 알고 있으면 cell solution에 sample
buffer를 넣고 heating -> 원심분리 ->sup. 전기영동 하면 됩니다.
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레벨4
hihithere
(일반인)
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21.03.08 18:44
아.. 이해했습니다.
감사합니다.
그럼 혹시 sample buffer만 가지고도 lysis가 충분할까요?
protein량이 대략 10ug일거라는 추측아래요.
(cell solution 10 ul = protein 10 ug)
동물 세포는 membrane만 가지고 있기 때문에 SDS가 있는 조건에서
95도~100도, 5분 처리하면 충분히 분해됩니다.
1. 12ul cell solution into 1.5ml micro tube
2. Add 6X sample buffer 4ul
3. mix well and heating at 95oC for 5min
4. store at RT 5min and centrifuge at 13Krpm, 10min
5. electrophoresis