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 전체 > Molecular Biology-DNA > Transformation
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질문 Pml I 제한효소 써보신 분 계신가요?
알감감선(대학생)  | 03.06 16:12

Pml I 제한효소로 원하는 부위 자르려고 하는데 안잘리네요 ㅜ

 

제한효소 주문한지 얼마 안돼서 제한효소 문제 같지는 않고

 

CutSmart buffer 사용해서 하고 있습니다

 

DNA는 E.coli MC1061 형질전환 해서 사용하고 있는데

 

농도도 변화시켜 보고 (이미 충분하겠지만..)

반응시간도 overnight까지 해봤는데 진짜 안잘리네요..

 

어쩌다가 한번 잘렸는데 다른 조건이랑 별 차이가 없어서 더 막막합니다 ㅜㅜ

왜 이럴까요 ㅜㅜ

#제한효소
 
#transformation
 
#ligation
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  03.06 16:48  

Pml I은 37도 에서 잘 잘리는 효소입니다.

간혹 DNA에 salt가 많은 경우 안잘리기 때문에 plasmid를 한번 정제를 해서

잘라보세요.

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