Pml I 제한효소로 원하는 부위 자르려고 하는데 안잘리네요 ㅜ
제한효소 주문한지 얼마 안돼서 제한효소 문제 같지는 않고
CutSmart buffer 사용해서 하고 있습니다
DNA는 E.coli MC1061 형질전환 해서 사용하고 있는데
농도도 변화시켜 보고 (이미 충분하겠지만..)
반응시간도 overnight까지 해봤는데 진짜 안잘리네요..
어쩌다가 한번 잘렸는데 다른 조건이랑 별 차이가 없어서 더 막막합니다 ㅜㅜ
왜 이럴까요 ㅜㅜ
Pml I은 37도 에서 잘 잘리는 효소입니다.
간혹 DNA에 salt가 많은 경우 안잘리기 때문에 plasmid를 한번 정제를 해서
잘라보세요.
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