실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
DNA band 해석 도와주세요
레벨5 GOHARD (대학생)
제가 디자인한 primer의 조건을 잡기 위해서, 먼저 positive control의
cDNA sample을 사용하여 적절한 annealing 온도를 구했습니다.
(단일 밴드로 아주 진하게 떴고 사진은 첨부하지 않았습니다. 1장 밖에
안되서..)
그런 다음, negative control과 positive control을 포함한 샘플의 cDNA를
사용하여 PCR을 하고 밴드를 확인하였는데 첨부한 사진과 같이 나왔습니다.
맨 왼쪽 lane 2개가 차례로 N.C랑 P.C이고 나머지는 샘플인데, 샘플은 일단
제쳐두더라고, 위에 적었듯이 조건 잡을 땐 P.C에서 증폭이 잘 됐는데,
사진에서는 밴드가 아주 희미하게 나오고 오히려 N.C에서 더 진하게 나온게
이상합니다.. 제 생각으론 RNA 정량에서 오류가 있어서 cDNA의
양이 달라지고 PCR까지 잘 못 된것으로 보이는데,
선생님들의 의견은 어떨지 궁금합니다.
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