- 유방암세포에서 과발현되는 단백질 일종인 HER2가 존재하는 것을
알고싶습니다.
: breast cancer cell line은 4가지로 분류합니다.
그 중에 HER2+ cell을 xenograft에 사용하면 HER2+가 되고 HER2-를
사용하면 HER2-가 됩니다.
따라서 HER2 유무는 사용한 cell line에 따라 달라지며 primary 또는
metastasis에 따라 해석이 달라집니다.
1st antibody는 primary cancer의 경우 human, metastasis의 경우 human or
mouse, 2nd antibody는 anti-human IgG or anti-mouse IgG를 사용하면
됩니다.
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레벨1
오선
(대학원생)
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21.03.04 15:25
답변 정말 감사드립니다.
제가 xenograft할 cell은 SK-BR-3로서 HER2+입니다. 제가 생산한 실험디자인은 anti-HER2의 효과를 보기 위함으로 nude mouse의 tumor growth inhibition의 차이를 보고싶습니다.
그렇다면 말씀해주셨던대로 IHC 진행시, 1st antibody는 human anti-HER2로 하면 될 것 같은데, 2nd antibody가 조금 헷갈립니다.
IHC staining을 위해서는 HRP conjugation과 같은것을 정하여야 하는데, IHC 전용 anti human IgG conjugated with HRP로 정하면 되는지 알고싶습니다.
- 제가 xenograft할 cell은 SK-BR-3로서 HER2+입니다.
: primary cancer는 HER2+가 됩니다.
- 제가 생산한 실험디자인은 anti-HER2의 효과를 보기 위함으로 nude
mouse의 tumor growth inhibition의 차이를 보고싶습니다.
: HER2+의 경우 반응성이 좋기 때문에 tumor size repression이 잘 나올 것
같습니다.
- 1st antibody는 human anti-HER2로 하면 될 것 같은데, 2nd antibody가
조금 헷갈립니다.
: 1st가 Human이기 때문에 2nd는 anti-human IgG를 사용하면 됩니다.
- IHC staining을 위해서는 HRP conjugation과 같은것을 정하여야 하는데,
IHC 전용 anti human IgG conjugated with HRP로 정하면 되는지
알고싶습니다.
: 네. HRP와 같이 colorimetric으로 해도 되고 fluorscent로 해도 됩니다.
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